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液固吸附色譜的原理
點擊次數(shù):368 更新時間:2016-06-02

液固吸附色譜
以吸附劑為固定相,以不同極性的溶劑為流動相,根據(jù)試樣中各組分吸附能力的不同而進行分離的方法,稱液相吸附色譜。在HPLC中常用全多空型硅膠微粒為吸附劑,直徑5-10um,由于顆粒小且多空,故柱效很高。ELISA試劑盒
液-液分配色譜
流動相與固定相均為液體的色譜法,稱液-液分配色譜法或簡稱液-液色譜法,按照固定相和流動相極性的差別,可分為正相和反相色譜法兩類。
正相液液色譜法 流動相極性小于固定相的液-液色譜法稱正相液-液色譜法。洗脫時,極性小的組分先流出色譜柱,極性打的組分在固定相中溶解度大,后流出色譜柱。
原始的正相色譜以含水硅膠為固定相,以乙烷經(jīng)等為流動相,由于固定液易流失,已被化學(xué)鍵合色譜法取代,化學(xué)鍵合相是將固定液化學(xué)鍵鍵合在載體表面形成的固定相。正相色譜常用的氰基鍵合相,性質(zhì)與硅膠的性質(zhì)差異較大,常用語糖類的分析。
正相色譜以郵寄溶劑為流動相,使用成本較高。
反相液-液色譜法 流動相極性大于固定相的液-液色譜法稱反相液-液色譜法,洗脫時樣品中急性大的組分縣流出色譜柱。為了防止固定液的流失,反相色譜法均使用化學(xué)鍵合相,典型的反相化學(xué)鍵合相,用多孔載體上化學(xué)鍵合的十八烷基為固定相,流動相常用甲醇-水和乙腈-水。非典型反相色譜系統(tǒng),由弱極性或中等極性的鍵合相和極性大于固定相的流動相構(gòu)成。
反相鍵合色譜法固定相不流失,流動相以水為主,用甲醇或乙腈調(diào)節(jié)極性,應(yīng)用范圍很寬,且使用成本低,用HPLC中應(yīng)用zui廣。
一般的反相色譜法,主要用于分離分析非極性和中等極性的化合物,但用兩種改進的方法,亦可分離離子化合物。其一為離子對色譜法,在流動相中加入樣品離子的反粒子,使其與樣品離子構(gòu)成不荷電的中性離子對,增加其在非極性固定相中的溶解度,使分配系數(shù)增加,改善分離效果。分析堿類時可在流動相中加入烷基磺酸鹽(PIC),分析酸類則加入四丁基胺磷酸鹽(TBA)等。這種方法可以使C18柱子一柱多用,用其取代離子交換法,可避免離子交換法流動相對泵和流路的腐蝕,缺點是PIC試劑較貴,其二為離子抑制色譜法,通過調(diào)節(jié)流動相的PH,抑制樣品則分的解離,增加其在固定相中的溶解度。在流動相中加入醋酸等弱酸,氨水等弱堿,磷酸鹽及醋酸鹽等緩沖鹽調(diào)節(jié)ph即可用于分離有機酸和有機堿。這種方法比離子對法成本低,但重復(fù)性差,且要注意,流動相PH應(yīng)在2-8之間,超出此范圍可能使鍵合基團脫落、試驗后要及時用不含緩沖鹽的流動相沖洗,以防腐蝕儀器流路系統(tǒng)。

EphB2 R    酪氨酸蛋白激酶受體B2抗體
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167)    磷酸化雌激素受體ER alpha 抗體
EGFP    重組增強型綠色熒光蛋白抗體
ER-Alpha    雌激素受體α抗體(用于western blot)
Estrogen Receptor alpha + beta    雌激素受體α/β抗體
Anei-ENPP2    自分泌運動因子抗體
Ephrin A3    酪氨酸蛋白激酶A3受體抗體
EHM2    EHM2蛋白抗體
phospho-eIF4E (Ser209)    磷酸化真核翻譯起始因子4E抗體
eEF1A1    翻譯延伸因子EF-1a抗體
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537)     磷酸化雌激素受體α抗體
phospho-EGFR (Tyr1068)    磷酸化表皮生長因子受體抗體
phospho-Erk1 (Thr202 + Tyr204)     磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體
phospho-ERK1 (Thr202/Tyr204) + ERK2 (Thr183/Tyr185)    磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體

ELISA試劑盒

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