我們知道,ELISA試劑盒可分為多種類型測定,是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。 我公司技術(shù)部將各種ELISA常用方法的優(yōu)勢劣勢進(jìn)行對比,結(jié)果如下:
一、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短,因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
劣勢:試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記,但不是每種抗體都適合做標(biāo)記,費(fèi)用相對提高。
二、間接法:此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
優(yōu)勢:二抗可以加強(qiáng)信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標(biāo)記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應(yīng)性。
劣勢:交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高。
三、雙抗體夾心法:被檢測的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測抗體,此抗體可用酶標(biāo)記后直接測定抗原的量;或不標(biāo)記,再透過酶標(biāo)記的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取,才可避免交互反應(yīng)或競爭相同的抗原結(jié)合部位。
優(yōu)勢:高靈敏、高專一性,抗原無須事先純化。
劣勢:抗原一定得擁有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。
Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
EXPB-2 植物延展素-β(抗原)
FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1
Agtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a) 血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原
FasL(抗原)
Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烴受體抗原
Fe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原)
FGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素結(jié)合生長因子( 酸性成纖維細(xì)胞生長因子)(多肽片斷抗原)
fgL2 (Fibrinogen-like 2) 凝血酶原酶 (又稱:纖維介素蛋白;前凝血素)
FLIP S/L peptide 凋亡調(diào)節(jié)基因之一(多肽抗原)
FoxP3 叉頭蛋白3-T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子(多肽抗原)
GAP-43 ( Growth associated protein-43 ) 生長相關(guān)蛋白-43(抗原)
Gastrin 胃泌素(抗原)
AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase) α-甲基?;o酶A消旋酶抗原