為你揭幕ELISA試劑盒的操作

  上海邦景有限公司是一家專注于生物的技術(shù)企業(yè)，學(xué) ELISA試劑盒等生物科技實(shí)驗(yàn)需求。目前很多客戶因?yàn)閷?duì)品牌的信任度問題，公司仍然是一個(gè)非常好的選擇上海邦景LISA試劑盒，是 你*。ELISA 通常人們使用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間，這種方法既靈敏又有效，受到了許多研究者的青睞。不過有時(shí)候雙抗夾心法并不是*選擇，例如有時(shí)候抗原特別小讓兩個(gè)大抗體難以附著，又或者抗體只有一個(gè)抗體結(jié)合位點(diǎn)。在上述情況下，競爭性ELISA就更為適用，這種方法是采用帶標(biāo)記的純化抗原與樣本中無標(biāo)記的抗原進(jìn)行競爭，以結(jié)合捕獲抗體。

抗體類型

單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA，實(shí)際上有時(shí)候二者結(jié)合效果更好。例如，對(duì)于雙抗夾心法而言，用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測有時(shí)更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原，隨后單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。

雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體與檢測抗體(不論多抗還是單抗)的配對(duì)很有講究。我們不希望捕獲抗體與檢測抗體競爭抗原上的同一位點(diǎn)，為此我們就需要確保捕獲抗體和檢測抗體所識(shí)別的抗原表位不存在重疊。如果捕獲抗體和檢測抗體之間發(fā)生了突，就會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生較大影響。要避免這一問題，我們可以選擇購買 “matched pair”的捕獲/檢測抗體對(duì)，這些打包在一起的抗體是商家經(jīng)過驗(yàn)證才推薦的好組合。

交叉反應(yīng)

如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個(gè)因素。盡管現(xiàn)在購買源自動(dòng)物的抗體越來越容易，我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會(huì)產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測時(shí)，檢測用的二抗必須特異性針對(duì)檢測一抗，而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。如果檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合，實(shí)驗(yàn)特異性就會(huì)大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗，來避免上述問題。