小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)檢測(cè)試劑盒操作說(shuō)明
十二月的這里,沒(méi)有北國(guó)的還冷,但是還是會(huì)覺(jué)得冷氣入侵,早晨起來(lái)可以看到層層淡淡的薄霧,因?yàn)閷W(xué)校在山上的緣故。還有54天,放寒假。十二月,我期待你會(huì)從青島回來(lái),突然出現(xiàn)在我的面前說(shuō),小幺,這是我給你的驚喜。畢業(yè)后,說(shuō)好的聚會(huì),通通沒(méi)有實(shí)現(xiàn),一個(gè)人的時(shí)候,翻開(kāi)相冊(cè),都沒(méi)有你的照片,心里微微的疼的難受。我想起這個(gè)相冊(cè)還是高二那年非非送的生日禮物,她說(shuō),我的照片太多。的確,好多,只是都是一個(gè)人的照片。接下來(lái)介紹小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)檢測(cè)試劑盒操作說(shuō)明
保存樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原,無(wú)內(nèi)毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血,高血脂樣品。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè)
6. 樣品應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。
7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃,若不能及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),或-80℃(6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),避免反復(fù)凍融。
8. 如果您的樣品中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù))。