大鼠ELISA檢測試劑盒雙抗體夾心法是檢測抗原常用的方法，操作步驟如下：

1、將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結合的抗體及雜質(zhì)。

2、加受檢標本：使之與固相抗體接觸反應一段時間，讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合，形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質(zhì)。

3、加酶標抗體：使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量正相關。

4、加底物：夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。

根據(jù)同樣原理，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物，即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。

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