布氏桿菌病熒光偏振試驗(yàn)(FPA)
 
    熒光偏振試驗(yàn)在我國尚未見有報(bào)道，但在某些發(fā)達(dá)國家已經(jīng)得到了大量應(yīng)用。這種方法是檢測抗原抗體相互作用的一種簡便技術(shù)，田間即可使用。原理是溶液中的分子做隨機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)(布朗運(yùn)動(dòng))，分子的大小是影響轉(zhuǎn)動(dòng)速率的主要因素，并與轉(zhuǎn)動(dòng)速率成反比，因而小分子較大分子轉(zhuǎn)動(dòng)得快。如果給分子標(biāo)記上熒光色素，大分子就會(huì)比小分子發(fā)射出更多的偏振光。
 
   FPA試驗(yàn)中，分子質(zhì)量小于50ku的抗原用熒光素標(biāo)記，然后加到待檢血清中，若抗體存在，則與標(biāo)記抗原結(jié)合后就會(huì)降低標(biāo)記抗原的轉(zhuǎn)動(dòng)速度，并可用儀器測定出轉(zhuǎn)動(dòng)速率的變化。診斷布氏桿菌病時(shí)，牛種布氏桿菌光滑型LPS的小分子質(zhì)量片段OPS(平均22ku)，標(biāo)記上異硫氰熒光素(FITC)用作標(biāo)記抗原。將此標(biāo)記抗原加到稀釋的血清或全血中，抗體含量可在2rain(血清)或15min(全血)內(nèi)用熒光偏振試驗(yàn)測定出來。
 
    其試驗(yàn)程序?yàn)椋号鸸璨ＡЧ苤屑尤胙寤蜓?，在熒光偏振分析儀(FPM)上讀取光分布值；熒光素標(biāo)記抗原加到管中，混勻后室溫下孵育2min(血清)或15min(EDTA處理的全血)，在FPM：上讀取第2個(gè)數(shù)值，高于臨界值的讀數(shù)判為陽性反應(yīng)。
 
    FPA診斷牛布氏桿菌的特異性和敏感性幾乎與競爭ELISA相同。診斷牛種布氏桿菌19株新近免疫牛的特異性大于99％。