IL-4抗CD23單抗檢測(cè)法
 
    IL-4能促進(jìn)B細(xì)胞膜表面CD23分子表達(dá)，一些BurkittB淋巴細(xì)胞瘤株(如Jijoy細(xì)胞)未受刺激時(shí)，CD23表達(dá)水平很低，經(jīng)IL-4刺激后，CD23的表達(dá)呈劑量依賴性增加。用抗CD23單抗間接免疫熒光法染色，可檢測(cè)人IL-4活性。
 
    (1)將5X105／mL的Jiioy細(xì)胞培養(yǎng)于含10％FCS的RPMI-1640培養(yǎng)液中。
 
    (2)取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞，用新鮮培養(yǎng)液將細(xì)胞配成5X 105／mL，接種于24孔板中，lmL／孔。分別加待測(cè)標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)IL-4(不同稀釋度)，并設(shè)陰性對(duì)照，培養(yǎng)48～72h。
 
    (3)洗細(xì)胞2次，以106—107／mL濃度的細(xì)胞重懸于含1％BSA，2mmoL／L疊氮鈉的PBS中。將細(xì)胞轉(zhuǎn)人Falcon分析管中，離心棄PBS，加100~L抗CD23單抗(5—10btS／mL)，置冰浴中15～30rain，用上述PBS洗2次。
 
    (4)加適當(dāng)稀釋的FITC標(biāo)記的羊抗鼠IgC，置冰浴15～30rain，同上洗細(xì)胞，重懸細(xì)胞于含2mmol／mL疊氮鈉的PBS中。
 
    (5)用流式細(xì)胞儀分析CD23分子的表達(dá)，以陽性細(xì)胞百分率表示，并計(jì)算IL-4活性單位；或用熒光顯微鏡觀察CD23分子的表達(dá)。
HCC 94 [HCC941122](子宮鱗癌細(xì)胞（高分化）)     ATCC    株 
A-431(表皮癌細(xì)胞)     ATCC    株 
HeLa 229(宮頸癌細(xì)胞)     ATCC    株 
CBRH-7919(肝癌細(xì)胞)     ATCC    株 
RH-35(肝癌細(xì)胞)     ATCC    株 
SHZ-88(乳腺癌細(xì)胞)     ATCC    株 
MLTC-1(睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞)     ATCC    株 
L6565(小鼠L6565白血病克隆細(xì)胞系)     ATCC    株 
F9(畸胎瘤細(xì)胞)     ATCC    株 
LLC Lewis(肺癌細(xì)胞)     ATCC    株 
C127(乳腺腫瘤細(xì)胞)     ATCC    株 
MFC(胃癌細(xì)胞)     ATCC    株 
B16(黑色素瘤細(xì)胞)     ATCC    株