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干細(xì)胞培養(yǎng)傳統(tǒng)方法
點(diǎn)擊次數(shù):654 更新時(shí)間:2015-08-06

人類干細(xì)胞通常是在一層飼養(yǎng)細(xì)胞上培養(yǎng)的,據(jù)認(rèn)為,這可為細(xì)胞提供必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并有助于防止細(xì)胞分化。zui近,一項(xiàng)新的研究對(duì)這種根深蒂固的做法提出了挑戰(zhàn)。

*,干細(xì)胞是很難維持和培養(yǎng)。像所有的真核細(xì)胞一樣,它們對(duì)養(yǎng)分的有效性、pH值、溫度、氧氣和二氧化碳的含量都很敏感,而且它們也易于分化,留給研究人員的細(xì)胞不同于他們打算在實(shí)驗(yàn)中使用的細(xì)胞。

在早期,研究人員發(fā)現(xiàn),在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)層的頂部培養(yǎng)干細(xì)胞,可阻礙分化并有助于維持干細(xì)胞的健康。但是MEF特別不容易維持自我。從那時(shí)起,研究人員和生物技術(shù)公司已經(jīng)開發(fā)出其他有效的飼養(yǎng)層細(xì)胞系,可提供干細(xì)胞培養(yǎng)方面的優(yōu)勢(shì),以及與干細(xì)胞之間更有利的相互作用,無(wú)飼養(yǎng)細(xì)胞的方法也已經(jīng)變得可用。但是,干細(xì)胞培養(yǎng)通常仍然需要研究人員成功地維持兩種類型的細(xì)胞,并且,無(wú)飼養(yǎng)層細(xì)胞的方法要求高水平的細(xì)胞接種密度、專業(yè)的媒質(zhì)和生長(zhǎng)補(bǔ)充劑,從而使得它們非常昂貴。

zui近,一項(xiàng)新研究,對(duì)長(zhǎng)期持有的觀念——飼養(yǎng)細(xì)胞為干細(xì)胞生長(zhǎng)提供必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并防止細(xì)胞分化,提出了一些質(zhì)疑。

為了調(diào)查飼養(yǎng)層細(xì)胞在干細(xì)胞培養(yǎng)中的作用,研究小組根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)程序需要,制備了人成纖維細(xì)胞培養(yǎng)物,但是在添加干細(xì)胞之前,他們用戊二醛或甲醛固定成纖維細(xì)胞。這會(huì)使細(xì)胞層的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)穩(wěn)定,但會(huì)殺死細(xì)胞。去除固定劑之后,他們把人類誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(hiPSC)分層堆放在死亡的飼養(yǎng)層細(xì)胞上。

他們發(fā)現(xiàn),hiPSC不僅粘附并生長(zhǎng)為健康的培養(yǎng)集落,而且它們也持續(xù)表達(dá)多能性標(biāo)志,從而表明分化也被阻斷。這些細(xì)胞也在體內(nèi)形成具有所有三個(gè)胚層的畸胎瘤,這是干細(xì)胞的一個(gè)定義性特征。

由于死亡的飼養(yǎng)層細(xì)胞不能給干細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),因此這些結(jié)果表明,它們?cè)诟杉?xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮的作用,并不像預(yù)期的那么重要。假設(shè),飼養(yǎng)細(xì)胞層的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu),可能在兩種細(xì)胞類型之間的關(guān)系當(dāng)中,扮演zui重要的角色。

這讓我覺(jué)得,我們可以用一種納米方法來(lái)培養(yǎng)干細(xì)胞。我們可以用3D打印技術(shù),模仿飼養(yǎng)層細(xì)胞的微毫米拓?fù)洌╪anotopology),并在未來(lái)*不使用飼養(yǎng)細(xì)胞。

即使在開發(fā)出模仿飼養(yǎng)層形狀的培養(yǎng)基之前,這些發(fā)現(xiàn)仍然可以降低成本、勞動(dòng)力,并簡(jiǎn)化干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。因?yàn)樵谶@個(gè)過(guò)程中飼養(yǎng)層細(xì)胞不需要保持活力,我們可以將它們儲(chǔ)存在室溫,并花更少的時(shí)間培養(yǎng)它們。

聯(lián)系人:王經(jīng)理
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