凍存的步驟：
1. 冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情形。
2. 使用ScienCell凍存液 混合均勻，置于室溫下待用。
3. 依細(xì)胞傳代培養(yǎng)的操作，收集培養(yǎng)好的細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1 ml) 計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4. 離心，去除上清液，加入適量冷凍保存溶液，使細(xì)胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml，混合均勻，
分裝于已標(biāo)示*之冷凍保存管中，1 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。
5. 冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16～18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
6. 冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設(shè)定程序之等速降溫機(jī)中，再放入液氮槽中。程序?yàn)? program 7: HB CELL 。

本公司代理ATCC細(xì)胞，提供售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì)的說(shuō)明書或價(jià)格信息，請(qǐng)咨詢?cè)诰€客服。

產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
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細(xì)胞培養(yǎng)技巧：
一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng)：
1. 在冷凍保存之前，應(yīng)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(log phase) 且存活率高，凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 ％
2. 冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì)，例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。
3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以5~10 ml 小體積分裝，4 度避光保存，勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以高壓蒸汽
滅菌后避光保存。在開(kāi)啟后一年內(nèi)使用，因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。
4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度：
4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml，細(xì)胞濃度不要太高，某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。
4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6，依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度，而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %或10 ％ DMSO，若是不確定細(xì)胞之冷凍條件，在做冷凍保存之同時(shí)，亦應(yīng)作一個(gè)backup culture，以防止冷凍失敗。 
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

槐果堿  英文名稱：Sophocarpine   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支 酪氨激酶C抗體

烏藥內(nèi)酯 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 腺苷受體A3抗體 MUC2 ELISA Kit 粘蛋白2(MUC2)ELISA試劑盒

多西他賽  英文名稱：Docetaxel   保存：-20℃   規(guī)格：50mg 視黃受體應(yīng)答蛋白2抗體

刺芒柄花素 、芒柄花素  英文名稱：Formononetin, formononetin   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支 味覺(jué)感受器蛋白T2R38抗體

糠莫米松  英文名稱：Mometasone furoate   保存：-20℃   規(guī)格：100mg/支 化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體

雷公藤內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Triptonide 泡盛曲霉 Aspergillus awamori釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

基正壬  英文名稱：Methyl nonyl ketone   保存：-20℃   規(guī)格：0.1ml 原鈣粘附蛋白1抗體

澳茄新堿 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢 人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠色氨羥化酶(TPH)ELISA試劑盒，英文名：TPH ELISA Kit

*泊甙(進(jìn)分) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分,sigma E1383  Etoposide 疊氮鈉葡萄糖肉湯/Azide Dextrose Broth鏈球菌、腸球菌、糞鏈球菌的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

千金子甾 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢 人吲哚胺2,3-雙加氧酶1（IDO-1）ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠β-內(nèi)啡肽(βEP)ELISA試劑盒，英文名：βEP ELISA Kit

仙鶴草酚D 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒，英文名：Gzms-A ELISA Kit

5,6-二基呫噸-4- 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢 人纖維膠凝蛋白2(FCN2)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠神經(jīng)型一氧化氮合酶(*)ELISA試劑盒，英文名：* ELISA Kit

四環(huán)素  英文名稱：Tetracycline   保存：-20℃   規(guī)格：200mg N-酰轉(zhuǎn)移酶8B抗體  

椎間盤髓核細(xì)胞說(shuō)明書果糖二磷酸鈉 CAS  規(guī)格： 100mg 訂購(gòu)|咨詢

奧美拉唑鎂 CAS 95382-33-5 規(guī)格： 100mg 訂購(gòu)|咨詢

順式 CAS  規(guī)格： 50mg 訂購(gòu)|咨詢

氫樟柳堿 CAS  規(guī)格： 100mg 訂購(gòu)|咨詢

異維A酸 CAS  規(guī)格： 100mg 訂購(gòu)|咨詢

芫花 CAS  規(guī)格： 2g 訂購(gòu)|咨詢

右旋糖酐分子量D2000 CAS  規(guī)格： 0.2g/支 訂購(gòu)|咨詢

川續(xù)斷皂苷VI(木通皂苷D) CAS  規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢

碳酸鈣 CAS 471-34-1 規(guī)格： 100mg 訂購(gòu)|咨詢

甲基原薯蕷皂苷 CAS 54522-52-0 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢

積雪草酸 CAS 464-92-6 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢

異烏藥內(nèi)酯; 異烏藥內(nèi)酯 CAS 728-61-0 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢

鉤吻堿；鉤吻素甲 CAS  規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/支 訂購(gòu)|咨詢

二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯 CAS 5058-13-9 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢