Matrigel 基底膜基質,Matrigel基質會有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻。所有操作均需在無菌環(huán)境下進行,試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。應使用預冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。 操作指南: BD采用技術,從富含胞外基質蛋白的EHS小鼠腫瘤中分離出BD Matrigel 基底膜基質,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,巢蛋白,硫酸肝素糖蛋白等組成,還包含生長因子和基質金屬蛋白酶等。BD Matrigel基底膜基質在室溫條件下,聚合形成具有生物學活性的三維基質,模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能,有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化,以及對細胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵染和基因表達的研究。 BD Matrigel 基底膜基質形成的三維培養(yǎng)基質,可促進上皮細胞、肝細胞、Sertoli細胞、黑色素瘤細胞、血管內皮細胞、甲狀腺細胞及毛囊細胞等的貼壁與分化。同時,Matrigel還能影響乳腺上皮細胞的蛋白表達,支持外周神經(jīng)的新生和牛輸卵管上皮細胞的分化。高濃度的Matrigel適用于研究體內血管生成和腫瘤細胞遷移及腫瘤模型的建立等。 細胞可在0.5mm厚度的Matrigel基質層表面生長,也可在1mm厚度的Matrigel三維基質內生長。過度稀釋的Matrigel會形成非膠質的蛋白層,可以用于細胞貼壁,但不能用于細胞的分化研究。 注意:可將凍融后的Matrigel分裝在多個小管,所有分裝均需用預冷的凍存管,迅速冷凍并保存,避免多次凍融。 Matrigel在22-35℃溫度環(huán)境下快速成膠,因此溶解時在4℃冰上過夜凍融(4度時會隨著溫度的上升部分成膠)。所有用品在使用前需置于冰浴,必須使用預冷的移液管、吸頭及小管操作Matrigel。成膠后的Matrigel可以在4℃24-48小時后重新呈液態(tài)。 用1ml無菌水溶解后添加于100ml HB0256中 Polymyxin B 多粘菌素B 1.2mg/支*5 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng)(SN標準) Poly Peptone Yeast Extract Medium 多價蛋白胨-酵母膏 (PY) 培養(yǎng)基 250 加入牛肉粒,用于肉毒梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(GB標準) Cooked Meat Medium Base 皰肉培養(yǎng)基基礎 250 加入皰肉基礎中,配成皰肉培養(yǎng)基 Dried Meat Particle 皰肉牛肉粒 100 用于肉毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)(GB標準) Egg Yolk Agar Base 卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎 250 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的牛奶發(fā)酵試驗 含鐵牛奶培養(yǎng)基 250 用于干燥食品的計數(shù)和培養(yǎng)(MERCK方法) Differentia Clostridial Agar 梭菌鑒別瓊脂(DCA) 250 用于食品和其它物質中梭菌的計數(shù)和培養(yǎng)(MERCK方法) Differentia Reinforced Clostridial Agar 強化梭菌鑒別瓊脂(DRCA) 250 用于梭菌的分離培養(yǎng)(MERCK方法) Reinforced Clostridium Agar 強化梭菌瓊脂 250
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