中文名稱:SETD8賴氨酸甲基轉移酶抑制劑(UNC0379) 英文名稱:UNC0379 產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 產品貨號:BJ-01X8049 UNC0379是一個選擇性、底物競爭性SETD8賴甲基轉移酶抑制劑,IC50值為7.3±1.0uM,對其他15種甲基轉移酶有很好的選擇性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! :1620401-82-2 純度:99.94% 分子量:413.56 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1) 準備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;雙抗,1%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。 二. 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)方法: 1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; ⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細胞復蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。 3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化; ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。 人 TICAM2 基因全長ORF克隆人血纖蛋白原γ鏈(FGG)免疫試劑盒*直銷 人 FLT1 轉錄變體2 基因全長ORF克隆人血纖蛋白(Fibrin)免疫試劑盒進口、組裝 人 SIGLEC10 轉錄變體5 基因全長ORF克隆人血吸蟲抗原免疫試劑盒進口、分裝 人 PFKFB3 基因全長ORF克隆人血吸蟲抗體(IgM)免疫試劑盒現貨供應 人 ADCYAP1R1 基因全長ORF克隆人血吸蟲抗體(IgG)免疫試劑盒*直銷 人 EPHA2 基因全長ORF克隆人血吸蟲(SH)抗體免疫試劑盒進口、組裝 人 EPHB3 基因全長ORF克隆人血栓素B2(TXB2)免疫試劑盒進口、分裝 人 EIF5 基因全長ORF克隆人血栓素A2合成(TX-A2)免疫試劑盒現貨供應 人 GBP2 基因全長ORF克隆人血栓素A2(TX-A2)免疫試劑盒*直銷 人 CKMT1A 基因全長ORF克隆人血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒進口、組裝 人 MVK 基因全長ORF克隆人血清淀粉樣蛋白P(SAP)免疫試劑盒進口、分裝 SETD8賴氨酸甲基轉移酶抑制劑(UNC0379)GPR109a受體激動劑(MK-0354) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg MK-0354氯、碘中和劑管 9ml*20 ADP受體抑制劑(Ticlopidine hydrochloride) 1mL(10mM)|1g Ticlopidine hydrochloride250mL 超敏化學發(fā)光(HRP)檢測試劑盒 Ultrasensitive ECL Kit 4℃保存 PDE5抑制劑(Tadalafil) 1mL(10mM)|50mg|100mg|500mg Tadalafil2 ug TetO-FUW-OSKM TetO-FUW-OSKM 低溫運輸,-20℃保存 NBC抑制劑(S0859) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg S0859500次 硅膠膜離心吸附柱再生液 Spin Column Recharger 常溫 CETP抑制劑(Anacetrapib) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg Anacetrapib2 ug pAc5.1B-EGFP pAc5.1B-EGFP 低溫運輸,-20℃保存 ACE抑制劑(Enalapril maleate) 1mL(10mM)|1g|5g Enalapril maleate大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(TSA) Tryptose Soya Agar 1kg fXa抑制劑(Betrixaban) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Betrixaban1瓶 Bel-7404細胞株 Bel-7404 低溫運輸和保存 RSK2抑制劑(BIX 02565) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg BIX 02565含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)顆粒 Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 300ml/袋*10 C-Raf/B-Raf/B-Raf V600E抑制劑(RAF265) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg RAF265100次 即用型EMSA試劑盒 EMSA Kit -20℃保存 ROCK激酶抑制劑(SAR407899 hydrochloride) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg SAR407899 hydrochloride250mL NP40 Permeating Solution in TBS,10X(NP40滲透液,10X) NP40 Permeating Solution in TBS,10X 常溫保存 ADP受體抑制劑(Prasugrel) 1mL(10mM)|100mg|500mg Prasugrel0.1mL×10 Rosetta (DE3) 感受態(tài)細胞 Rosetta(DE3) Competent Cell -80℃保存 操作規(guī)程 1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時. 2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。 3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。 4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。 6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。 7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。 8、結果分析 a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100 b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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