產(chǎn)品參數(shù): 中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 | 綠藻保色液Ⅱ |
| 100ml | BJ-01X6992 |
商品詳細介紹: 用途: 用于綠藻的保色保存。 注意事項: 主要由醋酸銅、福爾馬林等組成。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
實驗報告: 一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 培養(yǎng)操作步驟 : 1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。 Fasciola hepatica肝片吸蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周TYK2 非受體酪蛋白激2抗體 規(guī)格: 0.1mlBrd4/CAP 染色體相關(guān)蛋白CAP抗體 規(guī)格: 0.2ml Staphylococcus haemolyticus溶血葡萄球探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-chicken IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.3mlRPS3 核糖體蛋白S3抗體 規(guī)格: 0.2ml Spina gleditsiae皂角刺探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周COX6B 氧化亞基6B抗體 規(guī)格: 0.2mlox-LDL 氧化脂蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml Dictyocaulus filaria絲狀網(wǎng)尾線蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周IFN-Alpha/IFNA1/IFNA13/Interferon alpha 1 干擾素α抗體 規(guī)格: 0.1mlOct-4B(OCT4B-190)NT 胚胎干細胞關(guān)鍵蛋白190抗體(N端) 規(guī)格: 0.2ml Raillietina echinobothrida棘盤瑞氏絳蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周DMBT1 抑基因抗體 規(guī)格: 0.1mlFLASH/CASP8AP2 半胱蛋白8相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml Fowl Adenovirus(FAdV-B)禽腺病毒B型染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ADAM2 去整合素樣金屬蛋白2抗體 0.2mlAD7C-NTP 神經(jīng)絲蛋白抗體 0.2ml 小麥源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Wnt16 信號通路Wnt16抗體 規(guī)格: 0.2mlRAC1/MIG5 細胞遷移誘導因子5抗體 規(guī)格: 0.2ml Strongyloides ransomi豬類圓線蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PRAS40/AKT1 substrate 1 蛋白激AKT底物1抗體 規(guī)格: 0.2mlTSPAN5 四分子交聯(lián)體5抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2ml Tomato Spotted Wilt Virus(TSWV)番茄斑萎病毒RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周TNFR2/TRAF2/CD120b 瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體 規(guī)格: 0.1mlUTS2R/GPCR GPR14 G蛋白偶聯(lián)受體14抗體 規(guī)格: 0.1ml Semen cuscutae菟絲子PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周ATP6V1G2/V-ATPase G2 離子轉(zhuǎn)運ATP合成6G抗體 規(guī)格: 0.2mlLigamentum Nuchae Elastin 項韌帶彈性蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 綠藻保色液Ⅱ小鼠果糖胺(FRA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應 猴25羥基D3(25 HVD3)免疫試劑盒進口、分裝 豚鼠白介素10(IL-10)免疫試劑盒進口、組裝 大鼠凝血原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒*直銷 人組蛋白去乙酰化(HDAC)免疫試劑盒進口、組裝 大鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒進口、組裝 人胃蛋白原I 免疫試劑盒進口、分裝 魚烯醇丙酮酸羧激,線粒體(PCK2)免疫試劑盒*直銷 白M(IgM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應 柯氏尿素瓊脂 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 人緊密連接蛋白1(ZO1)免疫試劑盒*直銷
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