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公司公告

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產(chǎn)品展示
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Mps1抑制劑(MPI-0479605)
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產(chǎn)品型號(hào):
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
Mps1抑制劑(MPI-0479605)公司正在出售的產(chǎn)品:FAM154A FAM154A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlRffl/RING finger protein 189 環(huán)指蛋白189抗體 規(guī)格: 0.2mlAIM2 干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體 規(guī)格: 0.1mlCphospho-C CBL(Tyr700) 磷酸化原基因CBL2抗體 規(guī)格: 0.1mlFBXO21 F-box蛋白2
  Mps1抑制劑(MPI-0479605)的詳細(xì)資料:

培養(yǎng)操作步驟

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 

產(chǎn)品參數(shù):

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號(hào)

Mps1抑制劑(MPI-0479605)

MPI-0479605

1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

BJ-01X8298

商品詳細(xì)介紹:

MPI-0479605是有效的,ATP競(jìng)爭(zhēng)性的Mps1選擇性抑制劑,IC50為1.8nM,比作用于其他激酶選擇性高40多倍。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

:1246529-32-7

分子量:407.51

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

2.png 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

小鼠 RPL34-PS1 基因全長(zhǎng)ORF克隆綿羊甲狀腺素(T4)免疫試劑盒*直銷

小鼠 GLTSCR2 基因全長(zhǎng)ORF克隆綿羊基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP9/Gelatinase B)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠 NDUFS1 基因全長(zhǎng)ORF克隆綿羊基質(zhì)金屬蛋白3(MMP3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

小鼠 SCD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆綿羊基質(zhì)金屬蛋白1(MMP1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠 MAGEE1 基因全長(zhǎng)ORF克隆綿羊饑餓激素(GHRL)免疫試劑盒*直銷

小鼠 PZP 基因全長(zhǎng)ORF克隆綿羊黃體生成素(LH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠 IL20 基因全長(zhǎng)ORF克隆(密碼子優(yōu)化)綿羊環(huán)腺苷(cAMP)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

小鼠 IFNL3 / IL28B 基因全長(zhǎng)ORF克隆綿羊環(huán)鳥苷(cGMP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠 IFNL2 / IL28A 基因全長(zhǎng)ORF克隆綿羊花生四烯酸(AA)免疫試劑盒*直銷

小鼠 IL17B 基因全長(zhǎng)ORF克隆綿羊骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠 IL16 基因全長(zhǎng)ORF克隆綿羊睪酮(T)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

Mps1抑制劑(MPI-0479605)轉(zhuǎn)氫酶-2測(cè)試盒(紫外分光光度法)  50管/48樣  2 ug pMAL-c2G pMAL-c2G 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

線粒體分離和線粒體酶提取測(cè)試盒(差速離心法)  50管/48樣  弗拉特氏菌培養(yǎng)基  250g

α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測(cè)試盒(微量法)  100管/96樣  1瓶 NIH:OVCAR-3細(xì)胞株 NIH:OVCAR-3 低溫運(yùn)輸和保存

α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測(cè)試盒(紫外分光光度法)  50管/48樣  大腸桿菌噬菌體MS2液體培養(yǎng)基 Coliphage MS2 Liquid Medium 250g

檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒(微量法)  100管/96樣  1g 1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯 1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene 室溫保存

檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒(可見分光光度法)  50管/48樣  500mL Tris-HCl Buffer,2.0M,pH8.0  Tris-HCl Buffer,2.0M,pH8.0  常溫保存

檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒(HPLC)  50管/48樣  5mL 酵母蛋白抑制劑 Protease Inhibitor for Yeast 4℃保存

琥珀酸脫氫酶(SDH)測(cè)試盒(微量法)  100管/96樣  2 ug pTWIN 1 pTWIN 1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

琥珀酸脫氫酶(SDH)測(cè)試盒(可見分光光度法)  50管/48樣  100次 凝固血液DNAout Blood Clot DNAOUT 常溫

線粒體異檸檬酸脫氫酶(ICDHm)測(cè)試盒(微量法)  100管/96樣  2 ug pEFFP-C2 pEFFP-C2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

線粒體異檸檬酸脫氫酶(ICDHm)測(cè)試盒(紫外分光光度法)  50管/48樣  M17肉湯 M17 Broth 250g

 


產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: Mps1 抑制劑
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聯(lián)系人:王經(jīng)理
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