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公司公告

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產(chǎn)品展示
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UCHL5和Usp14活性抑制劑(b-AP15)
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產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品報價:
產(chǎn)品特點(diǎn):
UCHL5和Usp14活性抑制劑(b-AP15)公司正在出售的產(chǎn)品:UFC1 泛素結(jié)合UFC1抗體 規(guī)格: 0.2mlPDGFRL 小板源性生因子受體β樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlMesothelioma 間質(zhì)細(xì)胞蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlSAMD15/C14orf174 14號染色體開放閱讀框174 規(guī)格: 0.2mlPhospho-cdc2 (Tyr15) 磷酸化周期素依賴激2抗
  UCHL5和Usp14活性抑制劑(b-AP15)的詳細(xì)資料:

產(chǎn)品參數(shù):

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號

UCHL5和Usp14活性抑制劑(b-AP15)

b-AP15

1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

BJ-01X7474

商品詳細(xì)介紹:

b-AP15特異性抑制去泛素化酶(deubiquitinating)UCHL5和Usp14活性。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

:1009817-63-3

別名:NSC 687852

純度:98.03%

分子量:419.39

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作步驟

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
2.png

實驗要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

Herba eupatorii佩蘭探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周Beta galactosidase  β半糖苷抗體 規(guī)格: 0.2ml

Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周SERPINB10  絲蛋白抑制劑B10抗體 規(guī)格: 0.2ml

Viral Hemorrhagic Septicemia Virus(VHSV)病毒性出血性敗血癥病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Nurr1  核受體相關(guān)因子-1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Radix astragali preparata炙黃芪LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周PPP2R1B  蛋白質(zhì)磷酸2調(diào)節(jié)亞基1B抗體 規(guī)格: 0.2ml

火雞源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Phospho-MDM2(Ser186)  磷酸化雙微體2基因抗體 規(guī)格: 0.1ml

Human Coronavirus(HCoV-NL63)人NL63 探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周SMYD2  組蛋白甲基轉(zhuǎn)移SMYD2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Poinsettia Mosaic Virus(PnMV)一品紅花葉病毒RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周RRBP1  核糖體結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Semen armeniacae amarum苦杏仁PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周phospho-DOK1 (Tyr398)  磷酸化D酪激衰減蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Aeromonas salmonicida滅鮭氣單胞LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

Streptococcus dysgalactiae停乳鏈球探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周PTRF  RNA聚合1和轉(zhuǎn)錄釋放因子抗體 規(guī)格: 0.2ml

UCHL5和Usp14活性抑制劑(b-AP15)腎素抑制劑(Aliskiren)

THR-β激動劑(MGL-3196)

PDE-5抑制劑(Avanafil)

HDAC6抑制劑(ACY-775)

IK.ACh抑制劑(Pirmenol hydrochloride)

metalloprotease抑制劑(Phosphoramidon Disodium)

IP受體激動劑(MRE-269)

Vasopressin1激動劑(Felypressin)

鈣蛋白酶抑制劑(PD 151746)

間隙連接抑制劑(Gap 27)

血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(Cilazapril monohydrate)

 


產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: UCHL5和Usp14活性 抑制劑
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